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“指尖上”的蛋白质纯化——Capturem™膜技术

浏览:0 日期:2017年12月18日
摘要:
对于从事蛋白质研究的人员来说,纯化操作可谓是老生常谈了,它看似风平浪静,只需要“平衡-上样-洗涤-洗脱”按部就班的操作,实则险象环生,一点样品或者buffer的改变都有可能让我们从头再来,这时常让我们感概“原来你是这样的蛋白质纯化”!即便如此,我们从没有停止对过程的优化和对结果的追求,我们选择镍离子树脂来提高产物收量,我们使用钴离子树脂以求获得更高纯度的产物,我们把树脂和离心柱结合成为spin column,希望节省实验时间……
 
而这一次,我们聚焦Takara公司旗下Clontech品牌最新推出的Capturem™膜技术,希望将实验速度和易用性做到更好。也许,树脂法纯化蛋白质的发明人不曾想,有一天,一个带有特殊薄膜的小离心柱,经过几次简单的离心,就可以在5分钟内完成一次蛋白质纯化,不用长长的柱子,没有寒冷的低温室,无需漫长的等待。
 
 “Capturem”是“Capture”和“membrane”两个词的巧妙组合,即“具有捕获能力的膜”。Capturem™膜技术的基本原理与传统树脂是相同的,都是通过镍离子/protein A配基与蛋白质/抗体的亲和作用实现分离纯化,不同的是基质的设计,传统的树脂将配基偶联于琼脂糖凝胶,而Capturem™膜技术是将配基固定在具有多孔结构的膜上,通过对膜的改造,使其内表面积增大,能够固定更多的配基,因而对目的蛋白质/抗体具有更强的结合能力,相当于或高于75 mg/cm3树脂。

虽然仅通过一层薄膜远达不到制备级树脂的纯化产量,但是这种膜技术的巧妙设计大大缩小了柱床体积,因此带来的好处是传统树脂难以比拟的:
 
(1)室温条件下几步简单的离心操作,最快可在5分钟内完成一次纯化。
(2)样品可短时间快速通过纯化介质(膜),无须担心样品变性或扩散,同时杂质与介质的结合几率更低。
(3)“洗涤液体积/柱床体积”比例更大,同样体积的洗涤液对膜的洗涤效果更彻底。
(4)产物无需富集,可实现高浓度洗脱。
 
正是因为以上优点,在2016年瑞典举办的重组蛋白质技术讨论会上,Takara公司用于抗体纯化的Capturem™ protein A技术获得了“ELRIG技术奖”。(ELRIG是European Laboratory Research & Innovation Group的缩写,是一个服务于生命科学和药物研发人员的非盈利机构。)
 
Capturem™膜根据所结合的配基不同,能够捕获His标签蛋白质和抗体,因此可应用于His标签蛋白质和抗体的快速纯化。下方表格列出了不同规格Capturem™产品的实验参数,可以帮助您选择更适合自己实验的产品。

基于protein A纯化抗体的原理,Capturem™ IP & Co-IP Kit(635721)可应用于IP和Co-IP实验,为快速提取独立蛋白质或提取蛋白质-蛋白质复合物提供了完整、易用性的解决方案!  
 
还有应用了Capturem™膜技术的Trypsin柱(635722),2 min即可完成蛋白质消化,让您的蛋白质质谱实验流程顺畅的飞起来!!
 
Capturem™膜技术的出现,为大规模验证克隆子表达产物提供了快速、易用的解决方案,对于广大医药公司来说,Capturem™膜技术在抗体纯化领域的应用,大大缩短了抗体药物研发在筛选阶段的实验周期,为实现药物研发与疾病“赛跑”提供了可能。
 
每当新技术出现的时候,总有勇者敢于率先尝试,而这一次,希望您不再是看客,希望您欣然接受“指尖上”的蛋白质纯化带给您的惊喜,尽情享受Capturem™膜技术带给您的急速体验!

 
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